The sůl a mannitolový agar nebo slaný mannitol je pevné, selektivní a diferenciální kultivační médium. Byl vytvořen Chapmanem pro izolaci zejména patogenních grampozitivních koků Zlatý stafylokok.
Je však také užitečné pro izolaci Staphylococus epidermidis, který může být někdy přítomen jako oportunistický patogen a Staphylococcus saprophyticus, uznávaný močový patogen, mimo jiné druhy.
Někteří Enterococcus jsou schopni růst na tomto médiu, stejně jako na některých grampozitivních spór tvořících tyčích..
Toto médium je velmi užitečné při analýze klinických vzorků, ale také se používá v mikrobiologické studii potravin a při kontrole kvality průmyslových produktů, jako je kosmetika, léky atd..
Slaný mannitolový agar se skládá z extraktů a peptonů z hovězího masa, tripteinu, mannitolu, chloridu sodného, fenolové červeně a agaru.
Rejstřík článků
Mannitolový agar je selektivní díky vysoké koncentraci soli. Slanost působí jako inhibiční látka a zabraňuje růstu gramnegativních bakterií.
Je také rozdílný díky přítomnosti uhlohydrátového manitolu a indikátoru pH fenolové červeně. Z toho bakterie schopné fermentovat mannitol produkují kyseliny, okyselují médium, mění kolonie a médium na žlutou..
Na druhé straně, kolonie, které nefermentují mannitol, rostou v médiu, přičemž přijímají živiny poskytované masovými výtažky a peptony a tripteinem. Odtud bakterie extrahují uhlík, dusík, vitamíny a minerály nezbytné pro jejich růst..
Kolonie v tomto případě mohou být slabé nebo silně růžové a médium zůstává stejné barvy nebo se mění na fuchsii.
Agar je látka, která zajišťuje konzistenci média.
K přípravě jednoho litru slaného mannitolového agaru se zváží 111 g dehydratovaného média od výhodné komerční společnosti a rozpustí se v baňce v 1000 ml destilované vody..
Teplo se aplikuje za častého míchání média, aby se zlepšil proces rozpouštění. Vařte minutu.
Baňka se umístí na 15 minut do autoklávu při teplotě 121 ° C.
Po uplynutí této doby vyjměte baňku z autoklávu, nechte ji odpočinout a podávejte mezi 15 až 20 ml na sterilní Petriho misce, když je teplota přibližně 50 až 55 ° C..
Nechá se ztuhnout, objednává se obráceně v plaqueros a uchovává se v chladničce až do použití. Před zasetím vzorku počkejte, až destička dosáhne pokojové teploty.
Desky se naočkují pruhem nebo povrchovým výsevem pomocí špachtle drigalski. Konečné pH připraveného média musí být 7,4 ± 0,2
Barva dehydratovaného média je světle béžová a barva připraveného média oranžově červená.
Díky své vysoké selektivitě je toto médium ideální pro setí vzorků se smíšenou flórou, ve které chcete hledat přítomnost Staphylococus aureus, jako hlavní patogen tohoto rodu.
V tomto smyslu je jedním z jeho nejčastějších použití mikrobiologická analýza výpotků hltanu a vzorků nosního výtoku, zejména k detekci asymptomatických nosičů S. aureus.
Některé země zavedly tuto analýzu jako povinný požadavek pro lidi, kteří chtějí pracovat jako prodejci potravin..
Tato kontrola brání najímání dopravců S. aureus, čímž se vyhnete masivní otravě jídlem, v důsledku konzumace potravin kontaminovaných stafylokokovým enterotoxinem.
Může být také zahrnut do očkování infekcí ran, krevních kultur, mozkomíšního moku, bronchoalveolární laváže, mezi ostatními.
Solený mannitolový agar je užitečný pro opětovnou izolaci kolonií z kultur moči z CLED agaru nebo krevního agaru, jehož Gram odhalil grampozitivní koky ve shlucích..
Platí mimo jiné také v mikrobiologické analýze potravin, pitné vody, půdy..
Jakmile je připravena dávka misek se slaným mannitolovým agarem, je vhodné provést kontrolu kvality. Kontrolní kmeny jsou zasety, aby se ukázalo, zda dochází k jejich růstu.
Jako pozitivní kontrola jsou známé kmeny Zlatý stafylokok. Měl by uspokojivě růst, rozvíjet žluté kolonie a médium také mění stejnou barvu.
Podobně je vhodné zahrnout známý kmen Staphylococcus epidermidis. Měl by uspokojivě růst, rozvíjet růžové kolonie a médium zůstává stejné barvy nebo ztmavne na silněji růžové.
Jako negativní kontrola se používají kmeny, které by na tomto médiu neměly růst. Například známý kmen Escherichia coli nebo Klebsiella pneumoniae. Očekávaným výsledkem je úplná inhibice, tj. Žádný růst..
Navíc musí být inkubována neočkovaná destička. V něm by neměl být žádný růst ani změna barvy.
Je důležité, aby se destička nepoužívala, pokud existují známky poškození, jako je znečištění, dehydratace, změna barvy, mimo jiné.
Při použití slaného agaru s mannitolem je třeba vzít v úvahu některé důležité aspekty:
-Získání růstu žlutých kolonií neznamená, že tomu tak je Zlatý stafylokok. Je třeba si uvědomit, že některé kmeny Enterococcus jsou schopné růst v tomto médiu a fermentovat mannitol, stejně jako některé grampozitivní tyče vytvářející spory..
Proto je důležité provést Gram na kolonii a katalázový test..
-Na druhou stranu je třeba vzít v úvahu, že jiné druhy Staphylococcus jiné než aureus jsou také schopné fermentovat mannitol. Proto je důležité kolonii subkultivovat do živného bujónu, který odtud odebere a provede test na koagulázu..
Mezi druhy Staphylococcus, které mají pro člověka klinický význam a které mannitol fermentují, patří: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, mezi ostatními.
Jiní mohou reagovat proměnlivě, tj. Někdy pozitivní a někdy negativní. Někteří jsou S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, mimo jiné.
-Nedoporučuje se odebírat kolonie přímo z mannitolového agaru k provedení testu koagulázy, protože vysoká koncentrace solí v médiu může ovlivnit výsledek..
-Nakonec se doporučuje inkubovat misky naočkované slaným manitolem po dobu až 48 hodin, protože některé kmeny S. aureus může pomalu fermentovat mannitol, i když je to vzácné.
Zatím žádné komentáře