Cary Blair Střední zdůvodnění, příprava a použití

4848
Alexander Pearson

The napůl Cary Blair je polotuhý agar používaný k transportu a konzervaci biologických vzorků, které obsahují střevní patogeny, labilní a anaerobní mikroorganismy. Jako každý dopravní prostředek, jeho funkcí je udržovat vzorek v optimálních podmínkách, dokud nebude kultivován. Přítomné patogenní mikroorganismy i doprovodná mikroflóra musí zůstat životaschopné, ale bez zvyšování jejich populace..

Cary Blair Medium je výsledkem změny složení transportního média Stuart. Modifikace byla provedena v roce 1964 a spočívala v nahrazení systému regulujícího pH (glycerofosfát) anorganickým fosfátovým pufrem..

A. Culturette s médiem Cary Blair B. Sběrač stolice s médiem Cary Blair. Zdroj: A. Video Meganhow, získejte kulturu rány 2011 youtube.com B. Uživatel: Mattes [Public domain]

Přeformulování bylo nutné, protože jeho tvůrci si uvědomili, že glycerofosfát po určité době může být metabolizován některými saprofytickými bakteriemi. Ty se mnohonásobně překrývají s přítomnými patogeny.

Dalšími změnami byla eliminace methylenové modři a také úprava pH směrem k zásaditosti (pH 8,4). Všechny tyto změny zlepšily účinnost dopravních prostředků.

Původně bylo médium Cary Blair používáno k udržování střevních patogenů, jako je např Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae a Campylobacter sp.

Později však byla vidět účinnost při zachování životaschopnosti náročných a labilních patogenních mikroorganismů, jako jsou: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae a některé anaeroby.

Rejstřík článků

  • 1 Odůvodnění
  • 2 Příprava
  • 3 Použijte
    • 3.1 Typ vzorků
    • 3.2 Odběr vzorků
    • 3.3 Identifikace vzorku
    • 3.4 Převod
  • 4 Vyšetřování prováděná na dopravních prostředcích Cary Blair
  • 5 Kontrola kvality
  • 6 Reference

Základ

Médium Cary Blair obsahuje chlorid sodný, thioglykolát sodný, fosforečnan sodný, chlorid vápenatý a agar.

Chlorid sodný udržuje osmotickou rovnováhu média, fosforečnan sodný a chlorid vápenatý vyrovnávají pH. Thioglykolát sodný si zachovává nízký oxidačně-redukční potenciál, zatímco malá část agaru poskytuje polotuhou konzistenci..

Médium Cary Blair neobsahuje výživné látky, protože funkcí transportního média je udržovat vzorek, aniž by došlo ke změnám z hlediska vlhkosti a mikrobiální zátěže; to znamená, že se vyhýbá dehydrataci vzorku při zachování životaschopnosti a množství přítomných mikroorganismů.

Nakonec mírně zásadité pH zabraňuje odumírání mikroorganismů kyselostí, zejména Vibrios je velmi citlivý na kyseliny.

Příprava

Média Cary Blair jsou komerčně dostupná jako speciální zařízení připravená k použití. Přepravní systém je zakryt plastovým vakem Peel Pack. Uvnitř obsahuje tampon pro odběr vzorku a tubu s nádobou na polotuhé médium Cary Blaira..

Také na trhu existují komerční domy, které dodávají dehydratované médium pro jeho přípravu v laboratoři..

Odváží se 13,2 g dehydratovaného média a rozpustí se v jednom litru destilované vody. Zahřejte a protřepávejte přípravek, dokud se úplně nerozpustí. Rozdělte médium do zkumavek se šroubovacím uzávěrem (bakelit).

Napařujte zkumavky 15 minut. Nechejte vychladnout a až do použití udržujte při pokojové teplotě.

Neočkované médium Cary Blair lze optimálně skladovat až 18 měsíců při pokojové teplotě.

PH média musí být upraveno na 8,4 ± 0,2. Barva připraveného média je béžová s trochou opalescence.

Použití

Typ vzorků

Cary Blair Medium se používá, když vzorky stolice, rektálního výtěru a vaginálního výtěru nelze okamžitě zpracovat.

Pokud není k dispozici žádný dopravní prostředek, lze vzorky skladovat při -70 ° C.

Vzorkování

Tampón je impregnován vzorkem a je zaveden do média Cary Blair, aniž by dosáhl dna.

Identifikace vzorku

Médium Cary Blair musí mít štítek, na kterém jsou umístěny základní údaje, například: jméno a příjmení pacienta, identifikační číslo vzorku, zdroj odběru vzorku, ošetřující lékař, datum a čas odběru. , předpokládaná diagnóza, antibiotická léčba.

Převod

Pevně ​​zakryté a přepravované při pokojové teplotě pro fekální vzorkyZatímco u vaginálních vzorků při hledání anaerobních mikroorganismů se doporučuje přepravovat vzorky při 4 ° C.

Doporučená doba přenosu je ve všech případech 4–6 hodin, maximálně 24 hodin..

Pokud je přítomnost Campylobacter jejuni ve vzorcích stolice, které nelze zpracovat do 24 hodin, se doporučuje skladování v médiu Cary Blair při 4 ° C.

Výzkum prováděný na dopravních prostředcích Cary Blair

Několik studií ukázalo, že médium Cary Blair může zůstat životaschopné pro enteropatogenní mikroorganismy rodu Shigella a Salmonella po dobu až 49 dnů po odebrání vzorku..

Pro jeho část, Vibrio cholerae, Další důležitý střevní patogen je schopen přežít po dobu 22 dnů Yersinia pestis (původce bubonického a pneumonického moru) lze obnovit po 75 dnech.

Navzdory prokázané odolnosti, pokud jde o výtěžnost těchto mikroorganismů, se však doporučuje, aby odebrané vzorky byly co nejrychleji transportovány v médiu Cary Blair do laboratoře..

Podobně, jakmile vzorek dorazí do laboratoře, musí být neprodleně zaset do příslušného kultivačního média..

Na druhou stranu se médium Cary Blair kromě toho, že je užitečné pro transport fakultativních mikroorganismů, doporučuje také pro vzorky obsahující anaerobní patogeny..

V tomto smyslu společnost DeMarco a spolupracovníci v roce 2017 provedli studii nazvanou: Přežití vaginálních mikroorganismů ve třech komerčně dostupných transportních systémech.

Ukázali, že transportní médium Cary Blair je nejlepším transportním médiem pro konzervaci a regeneraci vaginálních anaerobních mikroorganismů. Podobně ukázali, že nejvyšší rychlosti zotavení bylo dosaženo, když teplota přenosu byla 4 ° C..

Proto se dospělo k závěru, že teplota pro transport vaginálních výtěrů (anaerobních mikroorganismů) by měla být 4 ° C. Zatímco u vzorků stolice hledajících fakultativní mikroorganismy je ideální teplotou pokojová teplota..

QA

Kmeny známé jako Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis  ATCC 14028, Vibrio cholerae Y Campylobacter sp.

Médium se naočkuje zvoleným kmenem a udržuje se při teplotě místnosti po dobu 24 hodin. Poté jsou zasety do příslušných kultivačních médií. Ve všech případech se očekává uspokojivé zotavení daného mikroorganismu..

Reference

  1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN a kol. Přežití vaginálních mikroorganismů ve třech komerčně dostupných transportních systémech. Anaerobe. 2017; 45: 44-49.
  2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Porovnání konzervačních médií pro skladování vzorků stolice. J Clin Microbiol. devatenáct devadesát pět; 33 (8): 2176-2178.
  3. Dan M, Richardson J, MD Miliotis, Koornhof HJ. Srovnání konzervačních médií a podmínek mrazu pro skladování vzorků stolice. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. vyd. Redakční Panamericana S.A. Argentina.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Redakční Panamericana S.A. Argentina.
  6. Laboratoře Conda Pronadisa. Napůl Cary Blair. K dispozici na: condalab.com
  7. Laboratoř Metrix. Cary Blair. Dostupné na: metrixlab.mx

Zatím žádné komentáře