The laktofenolová modř nebo bavlněná modrá je přípravek s jednoduchými barvicími vlastnostmi. Používá se v klinických laboratořích k barvení hlavně houbových struktur, jako jsou hyfy, zárodečné zkumavky a spory..
Pomáhá při předpokládané nebo předběžné diagnostice určitých hub, vždy je však vhodné diagnózu posílit konkrétnějšími testy, jako jsou biochemické nebo sérologické testy..
Laktofenolová modř je tvořena kyselinou mléčnou, anilinovou modří, glycerinem, fenolem a deionizovanou vodou. Lze jej připravit v laboratoři nebo si ho můžete zakoupit připravený k použití. Jakmile je připraven, je připraven k použití, za žádných okolností by neměl být ředěn, protože tato akce poskytne strašné výsledky.
Koncentrace jeho složek je ideální pro barvení houbových struktur, protože fenol eliminuje doprovodnou bakteriální mikroflóru, zatímco kyselina mléčná vytváří ochranný film kolem houbové struktury. Nakonec má anilinová modř afinitu k přilnutí ke strukturám houby..
Rejstřík článků
Pomocí laktofenolové modři se provádí jednoduché barvení houbových struktur určité mykologické kultury. Říká se tomu jednoduchý, protože používá pouze jedno barvivo.
Lactophenol blue, kromě barvení, také působí jako objasňovač vzorku, díky společnému působení kyseliny mléčné a fenolu, navíc se fenol chová jako mořidlo a současně zabraňuje lýze mikroorganismu inhibicí hydrolytické enzymy, které mohou být přítomny.
Zatímco kyselina mléčná zachovává morfologii struktur houby.
Na druhé straně má anilinová modř vlastnost přilnutí nebo vazby ke strukturám obsahujícím chitin. Struktury skvrna světle modrá.
Je třeba poznamenat, že buněčná stěna houbových mikroorganismů, zejména plísní, obsahuje chitin, a proto je toto barvivo ideální pro barvení těchto mikroorganismů..
Roztok laktofenolové modři je mírně zakalené, mírně zakalené, vodné barvivo, silně kyselé, světle modré barvy. Zůstává stabilní, pokud je skladován mezi 15 ° C a 25 ° C. Láhev musí být udržována správně uzavřená. Je dráždivý a žíravý pro pokožku a sliznice.
Vzorec pro přípravu jednoho litru laktofenolové modři je následující:
-250 g / l kyselina mléčná
-1,0 g / l anilinová modř nebo methylová modř
-500 g / l glycerinu
-250 g / l fenolu
-250 ml deionizované nebo destilované vody.
Fenol se rozpustí v předem zahřáté vodě. Přidá se kyselina mléčná a glycerin a velmi dobře se promíchají. Nakonec se anilinová modř rozpustí. Míchá se znovu a je připraven k použití.
Porce pro přípravu 80 ml roztoku laktofenolové modři jsou:
-20 g krystalů fenolu
-20 ml kyseliny mléčné
-40 ml glycerinu nebo glycerolu
-20 ml destilované vody.
Používá se k barvení houbových struktur a díky morfologickým charakteristikám pozorovaným na mikroskopické úrovni, aby bylo možné stanovit předpokládanou diagnózu houby.
- Je převzata čistá kultura houby, ze které chcete pozorovat její struktury.
- Je lepší pracovat v digestoři s laminárním prouděním nebo pod zapalovačem pomocí masky a rukavic, protože je nutné dodržovat normy biologické bezpečnosti, protože většina forem se snadno šíří v prostředí, a proto představuje nebezpečí pro obsluhu.
- Na sklíčko se umístí kapka laktofenolové modři..
- Malý čtverec kvalitní lepicí pásky je vyříznut a velmi opatrně přilepen na konec platinové rukojeti, již sterilizované a studené..
- Platinová rukojeť se přibližuje k nejpovrchnější části kolonie hub a kultury se dotýká velmi opatrně, přesně tam, kde je umístěna lepicí páska..
- Poté se vezme na sklíčko a umístí se těsně nad kapku laktofenolové modři, přičemž se dbá na to, aby byla páska dokonale prodloužena a namazána barvivem. Platinová rukojeť je velmi jemně odstraněna.
- Další kapka laktofenolové modři je umístěna na pásku a krycí sklíčko nahoře. Nepoužívejte příliš velký tlak, aby nedošlo ke zničení struktur houby, protože jsou extrémně křehké. Barvivo by mělo být ponecháno působit přibližně 3 až 4 minuty.
- Po této době je přípravek připraven k pozorování pod mikroskopem v 10násobném nebo 40násobném zvětšení. Pokud je vyžadováno pozorování 100x, použijte imerzní olej.
- Struktury houby jsou obecně zbarveny modře, s výjimkou dematiózních hub, které si u tohoto druhu houby zachovají svou charakteristickou hnědou barvu..
Je-li nutné studovat přímý biologický vzorek, jako je například sputum, hnis, exsudáty, sekrece, musí být předem proveden postup dekontaminace vzorku. K tomu se používá roztok NaOH.
V případě vzorků vlasů je lze barvit přímo.
Několik postižených chloupků (celkem 10) je odebráno z předpokládaných lézí tinea capitis (alopecické oblasti) a umístěno na sklíčko (3 až 4 vlasy na sklíčko). Několik kapek laktofenolové modři se umístí na vrch a okamžitě se zakryje krycím sklíčkem..
Uchopte sklíčko kleštěmi a opatrně zahřejte na hořáku. K tomu proveďte 3 až 4 rychlé průchody plamenem. Pozorujte mikroskop pod 40x a hledejte spory venku nebo uvnitř vlasů (ectothrix nebo endothrix). Pokud je to nutné, přidejte imerzní olej a sledujte 100x.
Po inkubaci předpokládané kultury Candida albicans v lidském séru po dobu 2 až 4 hodin při 37 ° C, odeberte část roztoku a obarvte laktofenolovou modří. Příprava byla pozorována pod mikroskopem při 40násobku. Je přítomna zárodečná trubice a blastospory se zbarvují jasně modře.
Národní asociace pro požární ochranu (NFPA) zavádí bezpečnostní list pro chemické látky z hlediska rizika, které představuje podle různých aspektů, které jsou symbolizovány barevným kosočtvercem a číslem v rozmezí 0-4.
Zdravotní rizika jsou označena modře, hořlavost červenou barvou, nestabilita nebo reaktivita žlutou barvou a všechna zvláštní rizika bílou barvou..
Zdravotní riziko, které podle NFPA představuje laktofenolová modř, je úroveň 3. To znamená, že látka je extrémně nebezpečná při požití nebo při přímém kontaktu s kůží nebo sliznicemi..
Je to vysoce korozivní a dráždivá látka.
Při styku s kůží a sliznicemi způsobuje těžké popáleniny.
Při požití může způsobit bolest hlavy, zmatenost, letargii, bezvědomí, zástavu dýchání nebo dokonce smrt..
Podle NFPA má laktofenolová modř stupeň hořlavosti 1. To znamená, že hoří, pouze pokud je zahřátý nad 94 ° C..
Uvedeno pod NFPA na úrovni 0 (nula) pro reaktivitu. To znamená, že nemá žádné riziko reaktivity, to znamená, že se jedná o chemicky stabilní látku..
Neposkytuje žádná další zvláštní nebezpečí.
Zatím žádné komentáře