Základní, pevná a kapalná selektivní kultivační média

2242
David Holt

The selektivní kultivační média jsou agary a bujóny, které slouží k izolaci definované skupiny mikroorganismů, přičemž inhibují vývoj ostatních. Jsou ideální pro setí polymikrobiálních vzorků, což umožňuje získání požadovaného patogenu mezi doprovodnou mikrobií.

Mezi tuhými a kapalnými látkami existuje široká škála selektivních médií. Některé jsou určeny k izolaci grampozitivních bakterií, jako jsou například koaguláza-pozitivní Staphylococcus, Lactobacillus, Bifidobacteria atd..

Selektivní kultivační média. Zdroj: Air1404 [CC BY 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by/4.0)]

Jiné pro získání gramnegativních patogenů, například druhy rodu Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas..

Kromě nich také existují pro podporu růstu hub a kvasinek, jako jsou například druhy Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatofyty..

Je třeba poznamenat, že některá neselektivní obohacená média se mohou stát selektivními po přidání antibiotik. Podobně mohou být některá kultivační média selektivní a diferenciální současně..

Na druhou stranu existují selektivní kapalná kultivační média; některé mohou sloužit jako obohacující médium, které zvýhodňuje exacerbaci selektivní skupiny bakterií, zatímco potlačuje jiné.

Selektivní kultivační média jsou v mikrobiologických laboratořích široce používána pro analýzu různých typů vzorků; stejně jako pro izolaci nejrůznějších mikroorganismů klinického, průmyslového, environmentálního a potravinářského zájmu.

Rejstřík článků

  • 1 Odůvodnění
  • 2 Selektivní pevná kultivační média
    • 2.1 Baird-Parkerův agar
    • 2.2 Agar BCYE s agarem nebo pufrem na kvasinkové uhlí
    • 2.3 BHI agar s antibiotiky
    • 2.4 BIGGY agar nebo Nickersonův agar
    • 2.5 Bordetový agar s gengou
    • 2.6 Campy agar s krví
    • 2.7 Agar Campylobacter Butzler
    • 2.8 Agar skirrowové s kampylobaktery
    • 2.9 CCF agar nebo agar s fruktózou, cykloserin, cefoxitin
    • 2.10 Cetrimidový agar
    • 2.11 Čokoládový agar s isovitalexem a vankomycinem
    • 2.12 CIN agar nebo agar s cefsulodinem, irgasan, novobiocin
    • 2.13 CNA agar (kolistin, kyselina nalidixová)
    • 2.14 Czapkův agar 
    • 2,15 EMB agar
    • 2.16 Endo agar
    • 2.17 Hektoenův agar
    • 2.18 Löwenstein-Jensenův agar
    • 2.19 Mac Conkey Agar
    • 2,20 slaného mannitolového agaru
    • 2,21 SS agar
    • 2.22 Agar Regan Lowe
    • 2.23 SABHI agar
    • 2.24 Krevní agar s bacitracinovým koněm
    • 2.25 Agar s dřevěným uhlím z koňské krve
    • 2.26 Krevní agar s kanamycin-vankomycinem (KV)
    • 2.27 Agar siřičitanu vizmutitého
    • 2.28 TCBS agar (thiosíran, citrát, žlučové soli)
    • 2.29 Thayer-Martinův agar
    • 2.30 Jasně zelený agar
    • 2.31 Vogel-Johnsonův agar
    • 2,32 XLD agar
    • 2,33 CHROMagar (Candida Medium)
    • 2.34 Middle Ellinghausen McCulough Johnson and Harris (EMJH)
  • 3 Selektivní kapalná kultivační média
    • 3,1 BHI vývar NaCl 6,5%
    • 3,2 EC vývar
    • 3,3 GN vývar
    • 3.4 Vývar Rappaport-Vassiliadis
    • 3.5 Selenitový vývar
    • 3.6 Tetrathionátový bujón
    • 3.7 Campy Thioglycollate bujón
    • 3.8 Todd-Hewittův vývar s krví a antibiotiky
  • 4 Odkazy

Základ

Selektivní kultivační média jsou založena na tom, že obsahují výživné látky, které podporují růst konkrétní bakterie nebo houby nebo jejich určité skupiny, a současně musí obsahovat inhibiční látky, které neumožňují vývoj jiných nežádoucích mikroorganismů..

Mezi nutriční látky, které mohou obsahovat, patří: pankreatický digest kaseinu, kvasnicový extrakt, polypeptony, mimo jiné.

Mezi inhibitory patří: antibiotika, žlučové soli, jasně zelená, křišťálově fialová, bazický fuchsin, eosin, methylenová modř, deoxycholát sodný, siřičitan sodný, sorbitan monooleát, citronan amonný, cetrimid, chlorid lithný, telurit draselný, malachitová zeleň, mimo jiné.

Média mohou být někdy selektivní i diferenciální. Podobně se stupeň selektivity u každého média liší..

Některé jsou vysoce selektivní a vyznačují se extrémními nepřátelskými podmínkami pro většinu mikroorganismů a pouze malé množství druhů je schopno odolat podmínkám přítomným v prostředí, a proto uspokojivě rostou. Například agar TCBS a agar MRS.

Zatímco jiné jsou mírně selektivní, to znamená ty, které inhibují specifickou skupinu mikroorganismů, jako jsou grampozitivní bakterie. Na druhou stranu upřednostňují růst velkého množství gramnegativních bakterií; například agar Mac Conkey.

Konečně existují kultivační média s nízkou selektivní schopností, to znamená média, která umožňují růst široké škály grampozitivních a gramnegativních bakterií, stejně jako některých kvasinek, přičemž inhibují pouze malou skupinu mikroorganismů. Příklad: EMB agar.

Selektivní pevná kultivační média

Baird-Parkerův agar

Médium určené k detekci koaguláza-pozitivních stafylokoků (Zlatý stafylokok). Obsahuje jako inhibiční látky chlorid lithný a telurit draselný.

Agar BCYE nebo kvasnicový extrakt z dřevěného uhlí s pufrovaným agarem

Jedná se o vysoce obohacené kultivační médium, zejména pro izolaci druhů Legionella a Nocardia. Toto médium se stává selektivním přidáním antimikrobiálních látek, jako je polymyxin B, vankomycin a anisomycin..

BHI agar s antibiotiky

BHI agar je původně obohacené médium, ale pokud se přidá chloramfenikol a cykloheximid, je ideální pro selektivní izolaci klinicky zajímavých hub..

VELKÝ agar nebo Nickersonův agar

Selektivní a diferenciální médium pro izolaci druhů Candida. Obsahuje citronan amonný, vizmut a siřičitan sodný, které působí jako inhibitory růstu bakterií.

Agar Bordet Gengou

Obohacené a selektivní kultivační médium, zejména pro izolaci B.ordetella pertussis Y Bordetella parapertussis. Obsahuje cefalexin, který inhibuje doprovodnou flóru.

Campy agar s krví

Médium používané k izolaci rodu Campylobacter. Obsahuje cefoperazon, vankomycin a amfotericin B k inhibici růstu gramnegativních, grampozitivních bakterií a hub.

Campylobacter Butzlerův agar

Speciální médium pro izolaci druhů rodu Campylobacter. Je mimo jiné doplněn koňskou krví. Obsahuje také různé inhibiční látky, jako je novobiocin, kolistin, cefazolin, bacitracin a cykloheximid..

Agar skirrowů Campylobacter

Selektivní médium pro izolaci druhů Campylobacter. Obsahuje koňskou krev a další živiny. Jako inhibiční látky obsahuje vankomycin, polymyxin B a trimethoprim.

CCF agar nebo agar s fruktózou, cykloserin, cefoxitin

Jak jeho název napovídá, obsahuje cykloserin a cefoxitin jako inhibiční látky a používá se k izolaci Clostridium diffcile ve vzorcích stolice, mimo jiné ve střevech.

Cetrimidový agar

Selektivní médium určené pro izolaci Pseudomonas aeruginosa, upřednostňování výroby pigmentů. Cetrimid (cetyltrimethylamoniumbromid) je látka, která inhibuje růst bakterií jiných než P. aeruginosa.

Čokoládový agar s isovitalexem a vankomycinem

Toto médium je původně velmi obohacené. Přidání vankomycinu je užitečné pro selektivní izolaci kmenů Neisseria gonorrhoeae Y N. meningitidis.

CIN agar nebo agar s cefsulodinem, irgasan, novobiocin

Je to mírně selektivní kultivační médium pro izolaci druhů Yersinia.

CNA agar (kolistin, kyselina nalidixová)

Je to speciální selektivní médium pro izolaci grampozitivních bakterií, jako je Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus a kvasinek, ale inhibuje vývoj gramnegativních bakterií, jako jsou Pseudomonas a druhy z čeledi Enterobacteriaceae..

Czapkův agar 

Médium určené pro kultivaci saprofytických bakterií a hub. Toto médium obsahuje anorganický dusík. Z tohoto důvodu je toto médium považováno za selektivní, protože mohou růst pouze mikroorganismy schopné používat anorganické sloučeniny jako jediný zdroj dusíku..

EMB agar

Mírně selektivní a diferenciální médium, které se používá k izolaci Enterobacteriaceae. Escherichia coli na tomto médiu je obzvláště detekován jasně zeleno-černou barvou jeho kolonií. Stupeň selektivity, který má, je způsoben přítomností anilinových barviv (eosin a methylenová modř)..

Endo agar

Minimálně selektivní a diferenciální médium, které se používá k izolaci a diferenciaci gramnegativních bacilů fermentujících a nefermentujících laktózu patřících do rodiny Enterobacteriaceae a dalších rodin.

Siřičitan sodný a bazický fuchsin inhibují většinu grampozitivních bakterií. Escherichia coli na tomto médiu vytváří charakteristické tmavě červené kolonie s duhově nazelenalým kovovým leskem.

Hektoenův agar

Selektivní a diferenciální médium pro izolaci enteropatogenních bakterií rodů Shigella a Salmonella. Jako inhibiční látka obsahuje žlučové soli, potlačující vývoj grampozitivních a některých gramnegativních bakterií..

Löwenstein-Jensenův agar

Médium speciálně určené pro izolaci a vývoj bakterií rodu Mycobacterium, zejména mj. Druhů tuberkulózy.

Médium obsahuje malachitovou zeleň; Tato látka inhibuje doprovodnou grampozitivní a gramnegativní flóru, které byly schopné odolat předchozí dezinfekci vzorku. Obsahuje také glycerin, který stimuluje růst M. tuberculosis, ale brání rozvoji M. bovis a další mikroorganismy.

Mac Conkey Agar

Jedná se o selektivní a diferenciální médium. Používá se k izolaci laktózových nenáročných, fermentujících a nefermentujících gramnegativních tyčinek.

Jeho selektivní charakter zajišťuje přítomnost žlučových solí a křišťálově fialové. Tyto látky inhibují růst grampozitivních bakterií a některých náročných gramnegativních tyčinek..

Slaný agar s mannitolem

Selektivní a diferenciální agar pro izolaci Zlatý stafylokok. Toto médium má vysokou koncentraci chloridu sodného, ​​který inhibuje růst většiny bakterií..

SS agar

Středně selektivní a diferenciální médium pro izolaci rodů Salmonella a Shigella. Médium obsahuje inhibiční látky, jako jsou žlučové soli, citrát sodný a jasně zelená. Tyto látky potlačují růst grampozitivních bakterií, určitých gramnegativních bakterií a některých koliformních bakterií..

Regan Lowe Agar

Selektivní agar pro izolaci Bordetella pertussis. Médium obsahuje uhlí, cefalexin a amfotericin B jako inhibiční látky..

SABHI agar

Selektivní médium pro izolaci patogenních hub, jako jsou dermatofyty, Blastomyces dermatitidis a Histoplasma capsulatum. Obsahuje chloramfenikol.

Koňský krevní agar s bacitracínem

Speciální médium pro izolaci Haemophilus influenzae. Bacitracin inhibuje doprovodnou flóru.

Agar s dřevěným uhlím z koňské krve

Selektivní médium užitečné pro izolaci kmenů Bordetella pertussis Y B. parapertussis z klinických vzorků. Obsahuje cefalexin, který inhibuje doprovodnou flóru.

Krevní agar s kanamycin-vankomycinem (KV)

Selektivní médium, speciální pro izolaci anaerobních bakterií, jako jsou Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium a Veillonella.

Sulfitový agar na vizmut

Selektivní médium pro izolaci Salmonella enterica podskupina enterica sérotyp Typhi. Toto médium obsahuje jasně zelený siřičitan bismutitý, který inhibuje růst grampozitivních mikroorganismů a určitých gramnegativních bakterií..

TCBS agar (thiosíran, citrát, žlučové soli)

Vysoce selektivní médium pro izolaci druhů rodu Vibrio. Obsahuje citrát sodný, žluči a alkalické pH, které inhibuje doprovodnou flóru.

Thayer-Martinův agar

Vysoce výživné a selektivní médium pro izolaci Neisseria meningitidis a Neisseria gonorrhoeae. Doprovodná flóra je inhibována přítomností vankomycinu, kolistinu a nystatinu.

Jasně zelený agar

Selektivní médium pro izolaci kmenů rodu Salmonella. Jak název napovídá, obsahuje jasně zelenou barvu jako inhibiční látku. Tím se zabrání růstu grampozitivních bakterií a velkého počtu gramnegativních mikroorganismů..

Vogel-Johnsonův agar

Jedná se o selektivní a diferenciální kultivační médium, formulované pro izolaci Zlatý stafylokok a inhibuje růst gramnegativních bakterií a dokonce i některých grampozitivních bakterií. Inhibičními látkami jsou telurit draselný, chlorid lithný a glycin..

XLD agar

Jedná se o selektivní a diferenciální médium pro izolaci enteropatogenů Salmonella a Shigella. Deoxycholát sodný dodává médiu selektivní charakter.

CHROMagar (Candida Medium)

Jedná se o selektivní a diferenciální médium, které pomáhá při izolaci a identifikaci druhů Candida. Médium obsahuje chloramfenikol, který inhibuje růst bakterií.

Middle Ellinghausen McCulough Johnson and Harris (EMJH)

Selektivní médium pro pěstování Leptospiras. Obsahuje polysorbát 80, který inhibuje růst většiny bakterií.

Selektivní kapalná kultivační média

BHI vývar NaCl 6,5%

Selektivní vývar pro izolaci Enterococcus. Vysoká koncentrace chloridu sodného inhibuje růst doprovodné mikroflóry.

EC vývar

Selektivní vývar pro regeneraci celkových a fekálních koliformních bakterií. Obsahuje žlučové soli, které inhibují růst dalších mikroorganismů.

GN vývar

Selektivní vývar pro získání Salmonella a Shigella. Obsahuje citrát sodný a deoxycholát sodný, které inhibují grampozitivní bakterie a koliformní bakterie.

Vývar Rappaport-Vassiliadis

Jedná se o selektivní obohacovací médium pro druhy Salmonella. Obsahuje malachitovou zeleň jako inhibiční látku.

Selenitový vývar

Jedná se o selektivní kultivační médium, které je užitečné pro obohacení vzorků, u nichž existuje podezření na přítomnost enteropatogenních bakterií rodu Salmonella..

Jak jeho název napovídá, obsahuje seleničitan sodný jako inhibiční látku potlačující růst grampozitivních bakterií a většiny bakterií v gastrointestinálním traktu..

Tetrathionátový vývar

Selektivní bujón pro obohacení a obnovu kmenů rodu Salmonella.

Tetrathionát vytvořený reakcí generovanou mezi thiosíranem sodným a jodovaným roztokem přítomným v médiu inhibuje růst koliformních bakterií a podporuje vývoj bakterií, které obsahují enzym tetrathionátreduktázu (Salmonella).

Obsahuje také žlučové soli a některé odrůdy zahrnují jasně zelenou; obě látky inhibují většinu grampozitivních a některých gramnegativních bakterií (koliformních bakterií).

Campy Thioglycollate vývar

Speciální vývar na podporu rozvoje C. jejuni subsp jejuni. Obsahuje amfotericin B, cefalothin, polymyxin B, trimethoprim a vankomycin.

Todd-Hewittův vývar s krví a antibiotiky

Slouží k obohacení vzorků a podpoře vývoje Streptococcus agalactiae vaginálních sekretů. Jako inhibiční látky obsahuje kyselinu nalidixovou a gentamicin nebo kolistin..

Reference

  1. Klinická mikrobiologická kultivační média (akademický rok 2012-2013). Dostupné na: asignatura.us.es
  2. BD Laboratories. Agar skirrow Campylobacter a agar Campylobacter Butzler. 2013. Dostupné na: bd.com
  3. IVD Laboratories. Löwenstein-Jensen. 2011. Dostupné na: bio-rad.com
  4. Neogen Laboratories. GN vývar (Hajna). K dispozici na adrese: foodsafety.neogen.com
  5. BD Laboratories. CHROMagar. Candida Medium 2014. Dostupné na: bd.com
  6. BD Laboratories. Vývar Rappaport Vassiliadis. 2003. Dostupné na: bd.com
  7. Webový portál Lifeder.com. K dispozici na: Lifeder.com
  8. BD Laboratories. Leptospira Medium Base EMJH2011 Dostupné na: http://legacy.bd.com
  9. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. vyd. Redakční Panamericana S.A. Argentina.
  10. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Redakční Panamericana S.A. Argentina.

Zatím žádné komentáře