The bakteriologická smyčka Jedná se o pracovní nástroj používaný mikrobiology k setí mikrobiálních kultur (bakterií nebo hub). Je to možná nástroj, který tito odborníci nejvíce používají.
Jeho použití se zdá být jednoduché, ale ve skutečnosti vyžaduje hodně školení. Před zahájením setí musí být smyčka sterilizována v Bunsenově hořáku, poté je odebráno mikrobiální inokulum, které může pocházet z kapalné kultury nebo pevné kultury..
Jakmile je inokulum odebráno, může být uloženo v kapalném médiu nebo naočkováno do pevného média. Po každém postupu je smyčka znovu sterilizována. Rukojeť také slouží k vytváření mikrobiálních šmouh na sklíčku.
Bakteriologická smyčka má mnoho jmen, včetně: platinová smyčka nebo smyčka, očkovací smyčka nebo očkovací smyčka, avšak její skutečné jméno je smyčka Kohle..
Materiál, kterým je rukojeť vyrobena, je obvykle slitina nikl-chrom (nichrom) nebo také platina. Další odrůdou dostupnou na trhu jsou plastové jednorázové bakteriologické smyčky..
Na druhou stranu existuje několik typů bakteriologických smyček, z nichž každá plní funkci v rámci úkolů prováděných mikrobiologem. Volba rukojeti bude záviset na tom, co je třeba udělat.
Například k provedení striata v důsledku vyčerpání za účelem izolace mikroorganismu se používá platinová smyčka, která končí uzavřeným kruhem, bez ohledu na to, zda je kalibrována nebo ne..
Zatímco, pokud se jedná o výsev vzorku moči, kde je důležité kvantifikovat CFU, je nutné použít kalibrovanou smyčku. Podobně je pro naočkování biochemických testů, které je nutné zasít propíchnutím, nezbytná smyčka jehly. Je důležité, aby rukojeť manipuloval vyškolený personál.
Rejstřík článků
Bakteriologické smyčky jsou tvořeny dvěma extrémy. Jeden konec odpovídá držadlu nebo základně, zatímco druhý je samotný držadlo.
Základna slouží k uchopení rukojeti během manipulace. Je obvykle kovový, ale má tepelný izolátor, který zabraňuje spálení obsluhy, když je hrot rukojeti sterilizován na zapalovači. Měří přibližně 20 cm, i když může být delší. Má závit pro nastavení rukojeti.
Jedná se o funkční konec, tj. O část, která přichází do kontaktu s mikroorganismy a s kultivačním médiem. Skládá se z jemného drátu, který je vložen do základny.
Rukojeť může být vyrobena z nichromu nebo platiny, proto se jí někdy říká platinová rukojeť. Je přibližně 6,5 cm dlouhý a má rozchod přibližně 0,20 mm. Rukojeť s rukojetí může měřit 26,5 cm. Měření se mohou u jednotlivých výrobců lišit.
Existuje několik typů bakteriologických smyček a každá z nich má své specifické použití. Typy rukojetí jsou následující: kalibrovaná prstencová rukojeť, nekalibrovaná prstencová rukojeť, rovná nebo jehlová rukojeť, špachtle, rukojeť ve tvaru „L“ a rukojeť s ostrým hrotem.
Na druhé straně mohou být rukojeti trvalé nebo jednorázové. Ty pro trvalé použití jsou sterilizovány v zapalovači, jsou opakovaně použitelné a velmi odolné. I když jsou jednorázové materiály z výroby sterilní, jsou použity pouze jednou a jsou zlikvidovány..
Je to nejpoužívanější rukojeť v mikrobiologické laboratoři. Používá se k odebrání inokula z mikrobiální suspenze (kapalné médium) nebo části kolonie (pevné médium), které se naočkuje do jiného kultivačního média, buď biochemického testu, nebo případně obohaceného nebo selektivnějšího média. . Také užitečné pro výrobu mikrobiálních šmouh na sklíčku.
S tímto typem smyčky lze počáteční očkovací látku pruhovat. Je také navržen tak, aby hladce klouzal po agaru, aniž by jej poškodil. To samozřejmě vyžaduje vyškolený personál, aby zvládl techniku setí, vyvinul správnou sílu a pohyby, aby dosáhl dobrého striatu..
S touto rukojetí lze provádět různé techniky setí. Příklad, pevná média v Petriho miskách se obvykle vysazují vyčerpáním (existuje několik technik, viz video 1).
Tato technika si klade za cíl získat izolované kolonie, aby je bylo možné studovat a identifikovat, zvláště když je vzorek polymikrobiální, to znamená, že kultura není čistá (obsahuje více než jeden typ mikroorganismu)..
Místo toho jsou klíny zasazeny do jednoduchého cikcaku, aby se získala bakteriální hmota, v tomto případě není nutné izolovat kolonie.
Někdy se také používají k odběru určitých vzorků. Například Rojas et al. Použil bakteriologickou smyčku ke sběru poškrábaných vzorků vaginální tkáně od krys..
Tato rukojeť, jak již název napovídá, je kalibrována tak, aby brala určité množství mikrobiální suspenze. Používá se, když je nutné, aby inokulum vyhovovalo tomu, co je v technice standardizováno.
Například je velmi běžné pro pěstování kultur moči. V tomto případě lze použít kalibrovanou smyčku 0,01 ml a jednu 0,001 ml..
Je třeba poznamenat, že kalibrované rukojeti mají míru chyby, která se mění v závislosti na úhlu, s nímž je vzorek odebírán, a velikosti ústí nádoby..
Pokud je rukojeť 0,001 ml vložena svisle do nádobky s malými ústy (≤ 7 mm), odebrané množství bude o 50% menší, než je požadováno.
K tomu dochází, protože čím menší je průměr ústí nádoby, tím vyšší je povrchové napětí, a proto se zvyšují adhezní síly mezi (sklo - kapalina). To způsobí, že náplň rukojeti bude menší.
Vzhledem k tomu, že pokud je v nádobě se širokými ústy (≥ 22 mm) pod úhlem 45 °, lze jímat o 150% více, než je požadované množství. V tomto případě je povrchové napětí nižší a soudržné síly sklo / plast se snižují, zatímco soudržná síla kapalina-kapalina se zvyšuje..
Z důvodu výše uvedeného jsou pro kultury moči někdy upřednostňovány jiné metody kvantifikace jednotek tvořících kolonie..
Také se tomu říká úchyt vlákna. Používá se k naočkování určitých biochemických testů, zejména těch, které vyžadují očkování technikou punkce. Příklad, polotuhá média, která se připravují ve formě bloku, například: SIM medium, MIO a O / F.
Navíc v případě MIO a SIM, které hodnotí motilitu, je nezbytné, aby byla punkce provedena pomocí jehlové smyčky, protože interpretace pozitivní motility nastává, když bakterie dorůstají po stranách původního inokula..
Test naočkovaný smyčkou může výsledky zfalšovat (falešně pozitivní). Z tohoto důvodu je třeba při tomto typu výsevu dbát na to, aby byla propíchnutí jedinečná a aby při jejím vyjmutí vycházela ve stejném směru, ve kterém.
Další zkouškou, která by měla být očkována jehlou, i když je připravena ve tvaru klínu, je Kligler. V této zkoušce se nedoporučuje, aby kyslík pronikal hluboko do agaru, protože pro určité chemické reakce je nutné médium chudé na kyslík. Tato rukojeť se také používá k doteku konkrétní kolonie za účelem subkultury.
Většina mikroorganismů dává měkké a snadno se vylučující kolonie. Existují však některá mikrobiální činidla, jejichž kolonie jsou tvrdé a suché, například mykobakterie obecně a některé houby. V těchto případech je užitečné použít rukojeť spatulate.
Jeho nejčastějším použitím je hubení kultur hub, zejména plísní..
Je užitečné pro odběr velmi malých kolonií přítomných v polymikrobiálních kulturách, aby bylo možné je subkultivovat.
Rukojeť musí být před a po použití sterilizována. Při sterilizaci bakteriologické smyčky v zapalovači postupujte následovně: rukojeť by měla být umístěna v horní části plamene, přičemž by měla být umístěna co nejvisleji, aby byla sterilizována od špičky nahoru..
Když jemné vlákno zčervená, dá se říci, že je sterilní. Pro jeho použití se ochladí a odebere se vybraný vzorek. (Viz video 2).
Zatím žádné komentáře