The crossmatch je řada laboratorních studií prováděných za účelem zjištění, zda jsou krevní produkty od dárce (zejména plná krev a koncentráty krevních buněk) kompatibilní s krví příjemce.
Jedná se o doplňkový test kromě kompatibility ABO a Rh faktoru. Důvodem vzájemného porovnávání je, že někdy dva jedinci (dárce-příjemce) mohou mít stejnou skupinu ABO a Rh, ale jejich krev je stále neslučitelná..
Taková nekompatibilita je způsobena přítomností protilátek proti řadě proteinů červených krvinek známých jako minoritní antigeny. Tyto antigeny nejsou běžně testovány, protože jsou určeny pro krevní skupinu (ABO) a Rh faktor.
Je to proto, že menší antigeny jsou mnohem méně časté a mají variabilní expresi u každého jedince, proto je prakticky nemožné je seskupit do kategorií, jak je to u skupiny a Rh faktoru..
Místo toho se dárcovské červené krvinky smíchají s pacientovým sérem (hlavní test shody) a pacientovými červenými krvinkami se sérovým sérem (menší test shody), aby se detekovala přítomnost reakcí antigen-protilátka..
Pokud existují protilátky proti menším antigenům, ať už v séru pacienta nebo dárce, je test považován za pozitivní, takže ve většině případů nelze danou jednotku krve transfukovat.
Rejstřík článků
Abyste plně pochopili, o čem křížové reakce jsou, musíte nejprve znát základy krevních skupin..
V tomto smyslu je nejdůležitější vědět, že krev lze rozdělit do čtyř skupin: A, B, AB a O.
Každá z těchto skupin exprimuje určitý protein (antigen) na povrchu červených krvinek, který je identifikován jako cizí prvek pomocí protilátek potenciálního receptoru jiné skupiny..
Nejpozoruhodnější věcí na reakcích antigen-protilátka při porovnávání krve je to, že pro existenci protilátek není nutná žádná předchozí expozice antigenu. Toto je známé jako přirozené protilátky..
Obecně platí, že aby v těle jedince byly protilátky, je nutné, aby jeho bílé krvinky byly dříve vystaveny antigenu.
To znamená, že v prvním kontaktu mezi cizím antigenem a organismem nejsou žádné protilátky, protože ty se generují později, po počátečním kontaktu. Proto je nemožné, aby imunitní systém měl protilátky například proti určitému viru, pokud mu nebyl v minulosti vystaven..
Jedinou výjimkou z výše uvedených jsou antigeny anti-AB. V těchto případech má osoba protilátky proti antigenu, které její červené krvinky nemají, přestože nikdy nebyla v kontaktu s červenými krvinkami někoho jiného. Toto je známé jako přirozené protilátky..
Krevní skupiny jsou určovány v případě systému ABO přítomností specifických antigenů (A nebo B) na membráně červených krvinek a naopak protilátek proti antigenu nepřítomnému na membráně erytrocytů..
Osoba s krevní skupinou A tedy exprimuje antigen A na povrchu svých červených krvinek, zatímco v séru jsou protilátky anti-B..
Naopak u pacientů ve skupině B se nachází antigen B, zatímco protilátky jsou anti-A.
Nyní mají pacienti s krví AB antigeny A i B. Proto neexistují žádné protilátky, protože by to zničilo červené krvinky této osoby..
Naopak ve skupině O, kde erytrocytová membrána nepředstavuje žádný ze dvou antigenů (ani A, ani B), zatímco v séru jsou protilátky anti-A a anti-B.
Z výše uvedeného lze snadno odvodit kompatibilitu krevních skupin ABO, protože znalost antigenu membrány erytrocytů automaticky zná protilátky v séru. Aby:
- Krev A je kompatibilní se skupinou A a skupinou O.
- Krevní skupina B je kompatibilní s krví B a O.
- Lidé se skupinou O mohou dostávat pouze krev O (protože mají protilátky anti-A a anti-B), i když jejich krev dostávají všechny ostatní skupiny bez problémů, protože jí chybí antigeny.
- Konečně. ti s krevní skupinou AB mohou přijímat krev ze všech ostatních skupin (A, B, O a samozřejmě AB), protože nemají protilátky proti žádnému z antigenů. Avšak pouze lidé ve skupině AB mohou dostat krev AB, protože všechny ostatní skupiny mají protilátky, které by tyto červené krvinky zničily..
Stejně jako u skupin ABO lze na povrchu erytrocytů nalézt řadu proteinů, které fungují jako antigeny stejným způsobem jako antigeny skupiny ABO..
Tyto antigeny však nejsou přítomny u všech jedinců. Jejich kombinace je heterogenní a penetrace (úroveň exprese proteinu) je variabilní, proto je klasifikace do skupin, jako je ta, která existuje pro ABO a Rh, nemožná. Proto odvozuje svůj název od „menších antigenů“, také známých jako „antigeny s nízkým výskytem“.
I když nejsou časté, mohou existovat přirozené protilátky proti menším antigenům. Mezi nejběžnější patří Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb a Kidd. Všichni jsou zodpovědní za velmi závažné hemolytické a posttransfuzní reakce.
Kromě toho může nastat případ senzibilizace proti menším antigenům předchozím kontaktem, buď s uvedenými antigenními proteiny v důsledku předchozích transfuzí nebo v důsledku zkřížené imunity..
Říká se, že existuje zkřížená imunita, když jsou dva antigeny ze dvou různých zdrojů (například červené krvinky a bakterie) velmi podobné, až do té míry, že protilátky proti jednomu z těchto antigenních proteinů reagují také s ostatními, protože jsou téměř identické.
Abyste tomu lépe porozuměli, vezměte si předchozí hypotetický příklad (antigeny z červených krvinek a bakterie). V obou případech neexistují přirozené protilátky, ale pokud je člověk vystaven bakteriím, vytvoří proti němu protilátky..
Takové protilátky budou později reagovat proti červené krvince, pokud jsou její antigeny velmi podobné antigenům bakterií, které vyvolaly tvorbu protilátek..
Pokud k tomu dojde, červené krvinky s tímto konkrétním antigenním proteinem nemohou být podány osobě, která má protilátky, protože by došlo k odmítnutí. V tom spočívá důležitost křížových reakcí.
Vzhledem k tomu, že není možné seskupit krev různých jedinců na základě minoritních antigenů, jediný způsob, jak zjistit, zda existují protilátky proti minoritním antigenům červených krvinek jiné osoby v krvi jedné osoby, je vzájemné porovnávání..
V případech, kdy jsou přítomny protilátky, je spuštěna hemolýza nebo aglutinační reakce, a proto se dospělo k závěru, že reakce byla pozitivní; to znamená, že existují protilátky proti minoritním antigenům (i když není přesně známo, který z nich). Jinak je test negativní.
Křížová měření jsou založena na reakci antigen-protilátka. Proto je u nich možné zjistit, zda jsou v séru příjemce protilátky proti antigenům červených krvinek dárce (nebo naopak), což vyvolává reakci antigen-protilátka.
Pokud neexistují žádné protilátky, nedojde k žádné reakci a test je označen jako negativní. Naopak, pokud je reakce pozitivní (během testu dochází k hemolýze nebo aglutinaci), lze usoudit, že jsou přítomny protilátky.
V tomto smyslu je důležité si uvědomit, že v séru dárce i příjemce mohou existovat protilátky proti červeným krvinkám. Proto existují dva typy křížových reakcí.
V séru pacienta mohou existovat protilátky proti erytrocytům dárce; ale může také nastat opak, to znamená protilátky v séru dárce proti pacientovým červeným krvinkám.
Proto existují dva typy křížové hry:
- Major crossmatch.
- Malý křížový zápas.
Oba typy se běžně provádějí v krevní bance před transfuzí krevních produktů, protože pokud je některý z testů pozitivní, existuje vysoké riziko transfuzních reakcí, které mohou ohrozit život pacienta.
Tento test hodnotí, zda sérum příjemce obsahuje protilátky proti červeným krvinkám dárce..
Pokud k tomu dojde, nelze podat krevní produkty, protože velké množství protilátek přítomných v pacientově plazmě velmi rychle zničí červené krvinky dárce a v tomto procesu způsobí katastrofické reakce v těle příjemce. Tyto reakce jsou tak závažné, že mohou být život ohrožující..
V tomto případě se určí, zda v séru dárce existují protilátky proti červeným krvinkám příjemce..
Pokud ano, protilátky začnou ničit erytrocyty příjemce. Protože je však množství protilátek omezené, reakce je méně intenzivní; i když je to stále nebezpečné.
Hlavní i vedlejší crossmatch jsou rozděleny do tří fází:
- Solný.
- Termální nebo inkubační.
- Coombs.
V první fázi jsou červené krvinky a sérum smíchány ve fyziologickém roztoku. Následně se přidá albumin a vzorek se inkubuje při teplotě 37 ° C po dobu 30 minut, aby se nakonec pokračovalo ve fázi coombs..
Technika křížového porovnávání je relativně přímá, protože zahrnuje přidání červených krvinek dárce do séra pacienta (hlavní křížový test) a také erytrocyty příjemce do séra dárce (menší křížový test)..
Aby bylo možné vyvolat reakci antigen-protilátka v relativně krátkém čase, je třeba dodržet řadu standardizovaných kroků. Tyto kroky jsou shrnuty zjednodušeným způsobem níže.
Je důležité si uvědomit, že následující část popisuje hlavní test kompatibility, i když kroky jsou stejné pro menší test kompatibility, ale výměna původu červených krvinek a séra..
- Přidejte do zkumavky 2 kapky séra od příjemce (od dárce, pokud se jedná o menší křížový test).
- Odeberte vzorek červených krvinek od dárce (od příjemce, pokud se jedná o menší křížový test).
- Umyjte a odstřeďte červené krvinky.
- Resuspendujte v 3% až 5% roztoku.
- Vložte kapku tohoto roztoku do zkumavky obsahující sérum příjemce. .
- Jemně promíchejte.
- Odstředivka.
- Odečtěte výsledek na displeji.
- Přidejte 2 kapky 22% albuminu do zkumavky, kde byla dokončena solná fáze.
- Inkubujte 30 minut při 37 ° C.
- Odstřeďujte 15 sekund.
- Odečtěte výsledek na displeji.
- Vezměte buňky ze zkumavky a omyjte je solným roztokem..
- Odstraňte supernatant.
- Přidejte dvě kapky Coombsova činidla.
- Jemně promíchejte.
- Odstřeďujte 15 až 30 sekund.
- Resuspendujte buňky a vyhodnoťte aglutinaci nebo hemolýzu v lampě.
Pokud dojde k aglutinaci nebo hemolýze v kterékoli z fází, je výsledek považován za pozitivní..
Zatím žádné komentáře