The chromatogram je dvourozměrný grafický záznam získaný na absorpčním médiu, ukazující separaci látek chromatografií. Na chromatogramu se vytvoří viditelný vzorec, vrcholy nebo skvrny, což odráží fyzickou separaci složek směsi.
Dolní obrázek je chromatogram se třemi píky A, B a C tří složek vzorku oddělených chromatografií. Bylo pozorováno, že každý ze tří vrcholů má jinou výšku a umístění na časové ose chromatogramu..
Osa nebo Y osa zaznamenává informace o intenzitě signálu (v tomto případě v milivoltech mV). Představuje záznam, v závislosti na detektoru, některých fyzikálních vlastností látky nebo samostatné složky směsi.
Výška píku je úměrná koncentraci složky oddělené od vzorku v optimálním systému. Například je snadné si představit, že složka B se nachází ve vyšším poměru než A a C..
Na ose x nebo ose X je znázorněn retenční čas složek vzorku nebo směsi. Je to čas, který uplyne od vstříknutí vzorku do jeho zastavení, přičemž u každé čisté látky se liší.
Rejstřík článků
Je to konečný záznam celého chromatografického procesu. Získají se z něj parametry, které jsou analyticky zajímavé. To lze získat jako elektronický soubor, tištěný histogram nebo na procesním médiu; například na papíře.
Osa Y je generována detektory signálu nebo odezvy intenzity, jako jsou spektrofotometry. Optimální analýza času, charakteristik získaných vrcholů nebo skvrn je zásadní; velikost, umístění, barva, mimo jiné.
Chromatogramové analýzy obecně vyžadují použití kontrol nebo standardů, látek známé identity a koncentrace. Analýza těchto kontrol umožňuje stanovit porovnáním s charakteristickými vzorky složek zkoumaného vzorku.
Na chromatogramu lze provádět pozorování a analýzu toho, jak byla provedena separace složek směsi. Jeho optimální studie umožňuje mimo jiné identifikovat látku, prokázat její čistotu, kvantifikovat množství látek přítomných ve směsi.
Získané informace mohou být kvalitativní; například když jsou látky identifikovány a je stanovena jejich čistota. Kvantitativní informace se týkají stanovení počtu složek ve směsi a koncentrace odděleného analytu..
Analýzou výsledků chromatogramu lze identifikovat různé látky porovnáním retenčních časů s retenčními časy známých látek. Lze pozorovat, zda sledované látky cestují stejnou vzdálenost, pokud mají stejný čas jako známé látky.
Například chromatogram může detekovat a identifikovat metabolity léčiv, jako jsou stimulanty a steroidy, v moči sportovců. Jedná se o důležitou podporu při studiu a výzkumu některých metabolitů produkovaných genetickými poruchami u novorozence.
Chromatogram usnadňuje detekci halogenovaných uhlovodíků přítomných mimo jiné v pitné vodě. Je nezbytný při laboratorních analýzách kontroly kvality, protože umožňuje detekovat a identifikovat kontaminanty přítomné v různých produktech.
Na chromatogramu můžete rozlišovat mezi čistými a nečistými látkami. Čistá látka by na chromatogramu vytvořila jediný pík; zatímco nečistá látka by produkovala dva nebo více vrcholů.
Správnou úpravou podmínek, ve kterých se provádí chromatografie, lze zabránit dvěma látkám ve vytvoření jediného píku..
Analýzou oblasti píku chromatogramu lze vypočítat koncentraci složek vzorku.
Proto je plocha píku úměrná množství látky přítomné ve vzorku. Tyto kvantitativní údaje se získávají ve vysoce citlivých systémech, jako jsou například systémy generované plynovou nebo kapalinovou chromatografií.
Jedna z klasifikací chromatogramů úzce souvisí s různými typy chromatografie, které generují odpovídající chromatogram.
V závislosti na provozních podmínkách se detektory budou mimo jiné lišit obsahem a kvalitou chromatogramu..
Chromatogram lze generovat přímo na papíře nebo na tenké vrstvě a přímo ukazuje distribuci nebo distribuci složek vzorku.
Je velmi užitečný pro oddělování a studium barevných látek, které mají přírodní pigmenty, jako je chlorofyl. Může být podroben vývojovým procesům v případě, že látky nemají přirozenou barvu, a je to užitečné pro kvalitativní studie.
Chromatogram lze také získat pomocí detektoru, který zaznamenává odezvu, výstup nebo konečný signál chromatografie. Jak již bylo zmíněno dříve, tímto detektorem je obvykle mimo jiné spektrofotometr, hmotnostní spektrometr, automatické sekvencéry, elektrochemikálie..
Chromatogramy generované ve sloupcích, ať už plynů nebo kapalin, stejně jako ty s vysokým rozlišením v tenkých vrstvách, používají detektory.
V závislosti na typu detektoru lze chromatogram rozdělit na diferenciální nebo integrální, v závislosti na formě odezvy detektoru..
Diferenciální detektor kontinuálně měří signál odezvy z chromatogramu, zatímco integrální detektory kumulativně měří odpovídající signál.
Diferenciální chromatogram je chromatogram získaný diferenciálním detektorem. Mezi tyto detektory patří například spektrofotometry a detektory změn elektrické vodivosti..
Tento typ chromatogramu ukázal výsledek separace aniontů ze vzorku, detekovaný nepřímou fotometrií. Stejné výsledky byly také získány pro studium iontů, například s konečnou detekcí pomocí konduimetrie..
Horní graf ukazuje příklad diferenciálního chromatogramu získaného automatickými sekvencery DNA (deoxyribonukleová kyselina). Graf jasně ukazuje vrcholy čtyř barev, jednu barvu pro každou z dusíkatých bází v DNA..
Díky podpoře počítačového programu je usnadněna interpretace sekvence bází analyzované DNA, stejně jako u složitějších analytů..
Integrovaný chromatogram odpovídá chromatogramu získanému integrálním detektorem. Tento chromatogram ukazuje výstup jedné studované složky. Více vrcholů se nezíská jako v diferenciálu.
Na integrálním chromatogramu se získá záznam s tvarem popsaným jako krok. Tato forma je částí chromatogramu, která odpovídá množství jedné látky, která opouští kolonu..
Zatím žádné komentáře