Kvantifikace antistreptolysinu O, zdůvodnění, technika, patologie

659
Anthony Golden

The antistreptolysin O je protilátka, která je generována v reakci na infekci způsobenou bakteriemi Streptococcus pyogenes nebo také známý jako beta-hemolytický streptokok skupiny A. Produkuje dva typy exotoxinů s hemolytickou aktivitou, které se nazývají „S“ a „O“ streptolysiny..

Streptolysin S je zodpovědný za beta hemolýzu, ke které dochází v krevním agaru, a přestože je toxický pro určité buňky imunitního systému, není antigenní. Zatímco streptolysin O, který je labilní vůči kyslíku, je zodpovědný za hemolýzu, ke které dochází pod krevním agarem, a to je antigenní.

Streptococcus pyogenes / Schéma toho, co se stane v testu ASTO (aglutinační reakce). (Protilátky navázané na latexové částice, které obsahují specifický antigen). Zdroj: Uživatel: Graham Beards [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0))] / Alejandro Porto [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses / by-sa / 3.0)]

Proto, když buňky imunitního systému interagují se streptolysinem O, vzniká specifická imunitní odpověď, která generuje aktivaci lymfocytů B. Tyto buňky produkují protilátky namířené proti streptolysinu O. Proto se tyto protilátky nazývají antistreptolysin O.

The Streptococcus pyogenes produkuje různé patologické stavy, mezi něž patří: tonzilitida, erysipel, impetigo, šestinedělí, šarlach a septikémie. Protilátky antistreptolysinu O se objevují 8 až 30 dnů po nástupu infekce.

Většina z těchto infekcí je v populaci velmi častá, takže je běžné, že lidé mají v krvi protilátky proti antrereptolysinu O. Nízké titry znamenají minulou infekci touto bakterií, ale vysoký nebo rostoucí titr označuje nedávnou nebo probíhající infekci..

Rejstřík článků

  • 1 Kvantifikace protilátek antistreptolysinu O.
  • 2 Pozadí techniky ASTO
  • 3 techniky
    • 3.1 - Semikvantitativní technika
    • 3.2 - Kvantitativní technika
  • 4 Patologie s vysokými titry antistreptolysinu O
    • 4.1 Post streptokokové autoimunitní nemoci
  • 5 Reference

Kvantifikace antistreptolysinových O protilátek

V laboratoři lze titr antistreptolyzinu „O“ měřit pomocí sérologického testu. Test antistreptolysinu O (ASTO) je založen na aglutinační reakci s latexem.

Lze to provést semikvantitativně, lze také kvantifikovat hlášení v křížcích nebo titr. Je normální a není významné najít hodnoty až do 200 IU / ml nebo Toddových jednotek / ml. Nad tuto hodnotu je považován za pozitivní a je klinicky významný..

Tento test nevyžaduje, aby byl pacient nalačno. Sérum se používá jako vzorek, to znamená, že se pacientova krev extrahuje a umístí do zkumavky bez antikoagulancia, poté se centrifuguje, aby se získalo sérum.

Základ techniky ASTO

Tato technika používá latexové částice jako podporu pro fixaci antigenu streptolysinu O. Absorbované částice antigenu reagují se sérovým pacientem. Pokud má pacient antistreptolysinovou protilátku O, budou se vážit na antigen připojený k latexové částice.

Tato vazba způsobuje aglutinaci, která je makroskopicky viditelná. Intenzita reakce je přímo úměrná koncentraci přítomných protilátek.

Techniky

- Semikvantitativní technika

Intenzitu reakce lze polokvantifikovat křížením. K tomu se odebere a umístí sérologická reakční destička:

50 µl séra a 50 µl činidla ASTO. Dobře promíchejte dřevěným párátkem a vložte do automatického mixéru na 2 minuty. Hodinky. Pokud automatický rotátor není k dispozici, musí být proveden ručně.

Výklad

Odpružení bez hrudek (uniformní): negativní

1. + = slabá reakce

2. ++ = mírná reakce

3. +++ = mírná reakce

4. ++++ = silná reakce

Séra, která jsou pozitivní s křížením 3 a 4, lze kvantifikovat.

- Kvantitativní technika

Pro kvantifikaci titru se provede sériové ředění 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16..

Postupujte následovně: Vezměte 4 zkumavky nebo Kahnovy zkumavky a do všech z nich vložte 0,5 ml fyziologického roztoku. Poté se do první zkumavky přidá 0,5 ml séra pacienta. Míchá se dobře. Tato zkumavka odpovídá ředění 1: 2.

Poté se 0,5 ml přenese do zkumavky 2 a dobře promíchá. Tato zkumavka odpovídá ředění 1: 4 atd., Dokud není dosaženo požadovaného ředění.

Vezměte 50 µl každého ředění a reagujte s 50 µl činidla ASTO na aglutinační destičce, jak je vysvětleno v semikvantitativní technice.

Výklad

Je bráno v úvahu nejvyšší ředění, při kterém je pozorována viditelná aglutinace. Výpočty se provádějí následovně:

ASTO = inverze nejvyššího pozitivního ředění x citlivost techniky (konstantní).

Příklad: Pacient s pozitivní reakcí až 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml nebo Toddovy jednotky / ml.

Referenční hodnota

Normální dospělý: až 200 IU / ml

Normální děti: až 400 IU / ml

doporučení

Doporučuje se připojit k pacientům pozitivní a negativní kontrolu, aby bylo zajištěno, že je činidlo v optimálním stavu. Pokud pozitivní kontrola neaglutinuje nebo negativní kontrola aglutinuje, činidlo nelze použít..

Reakce musí být interpretována po 2 minutách, po uplynutí této doby není platná, pokud dojde k aglutinaci. Je to o falešných pozitivech.

Hyperlipemická séra interferují s reakcí. Mohou dávat falešně pozitivní výsledky.

Izolovaná hodnota ASTO moc nepomůže. Musí to být doprovázeno příznaky.

Kromě toho je vhodné provést nejméně 2 měření ASTO při podezření na revmatickou horečku nebo post-streptokokovou glomerulonefritidu, aby se prokázalo zvýšení hladin antistreptolyzinu O a potvrdila se diagnóza..

Patologie s vysokými titry antistreptolysinu O

Anti-streptolysinové protilátky se zvyšují po infekci Streptococcus pyogenes o β-hemolytický streptokok skupiny A.

Patří mezi ně: akutní faryngitida, šarlach, impetigo, erysipel, šestinedělí a septikémie.

U některých pacientů, kteří utrpěli nedávné nebo opakované streptokokové infekce, se mohou vyvinout autoimunitní onemocnění jako důsledek nebo komplikace post-streptokokové infekce, jako je akutní glomerulonefritida a revmatická horečka..

Post streptokokové autoimunitní onemocnění

Revmatická horečka

Jedná se o zánětlivou komplikaci nebo následky, které se mohou objevit 1 až 5 týdnů po streptokokové infekci. Titry antistreptolysinu O se významně zvyšují 4 až 5 týdnů po nástupu onemocnění.

Diagnostiku řídí vysoký titr ASTO, ale nesouvisí se závažností onemocnění a jeho pokles neznamená zlepšení.

Protilátky antistreptolysinu O křížově reagují proti kolagenu a svalovým vláknům a ovlivňují některé orgány (mimo jiné srdce, kůži, klouby a nervový systém).

Tato komplikace nebo následky způsobují srdeční postižení, horečku, celkovou nevolnost, nehnisavou migrační polyartritidu, chorea atd..

Akutní glomerulonefritida

Akutní glomerulonefritida je nehnisavý následek, ke kterému dochází v důsledku ukládání komplexů antigen-protilátka na glomerulární bazální membráně.

Tvorba a cirkulace komplexů antigen-protilátka (ag-ac) generovaných streptokokovými infekcemi může vést k exsudativním změnám a zánětu glomerulů s proteinurií a hematurií.

Tyto ag-ac komplexy jsou uloženy v glomerulu a aktivují kaskádu komplementu, což vede k poškození glomerulárního endotelu. Proto je považováno za autoimunitní onemocnění, protože imunitní systém jedince poškozuje jeho vlastní tkáně..

Protilátky proti antrereptolyzinu O jsou velmi vysoké a hladiny komplementu jsou nízké.

Reference

  1. Wiener Laboratories. ASO latex. 2000. Dostupné na: wiener-lab.com.ar
  2. Přispěvatelé z Wikipedie. "Anti-streptolysin O." Wikipedia, The Free Encyclopedia. Wikipedia, The Encyclopedia Free, 23. ledna 2019. Web. 19. července 2019.
  3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Titr antistreptolysinu O ve zdraví a nemoci: hladiny a význam. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. K dispozici na: ncbi.nlm.nih
  4.  Sen E, Ramanan A. Jak používat antistreptolysin O titr. Arch Dis Child Educ Pract. 2014; 99 (6): 231-8. K dispozici v: ncbi.nlm.nih
  5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. (5. vydání). Argentina, Editorial Panamericana S.A.
  6. González M, González N. 2011. Manuál lékařské mikrobiologie. 2. vydání, Venezuela: Ředitelství médií a publikací University of Carabobo.

Zatím žádné komentáře