Faustův základ a materiály, kroky, výhody, nevýhody

798
Robert Johnston

The Faustova technika Jedná se o metodiku, která umožňuje koncentraci některých vajíček parazitů a / nebo larev obsažených ve výkalech flotací. Používá se, když jsou přímé testy stolice negativní nebo pokud chcete získat čisté vzorky bez zbytků.

Koncentrační metody pro koproparazitologická vyšetření jsou tří typů: flotací, sedimentací nebo metodami, které kombinují dvě předchozí. Tyto metody zvyšují šance na pozitivní výsledky.

Analýza stolice.

Faustova metoda spočívá ve smíchání části vzorku stolice s látkou hustší než koncentrovaná vejce nebo paraziti. To způsobí, že jsou méně husté a vznášejí se na povrchu. Supernatant se sbírá a prohlíží pod mikroskopem pro identifikaci a kvantifikaci..

Tato metoda se používá k vizualizaci vajíček helmintů. Na druhou stranu se ukázalo jako velmi citlivá metoda pro diagnostiku Giardia lamblia, bičíkový prvok se ve světě rozšířil. Metody flotace se nedoporučují u velmi těžkých vajíček parazitů, jako jsou tasemnice a trematody..

Paraziti jsou jednou z celosvětově nejrozšířenějších střevních infekcí, zejména v chudých zemích se špatnými hygienickými opatřeními. Z tohoto důvodu je pro diagnostiku a léčbu velmi užitečné mít citlivé metody, které umožňují identifikaci a kvantifikaci těchto parazitů..

Rejstřík článků

  • 1 Základ a materiály
    • 1.1 Materiály
  • 2 kroky
    • 2.1 Makroskopické a mikroskopické vyšetření
    • 2.2 Originální Faustova technika
    • 2.3 Faustova technika odstředěním
  • 3 Výhody
  • 4 Nevýhody
  • 5 Reference

Nadace a materiály

Tato technika je založena na existenci různých specifických hmotností vajec, parazitů, cyst, larev a detritů, přičemž se jako flotační metoda používají roztoky síranu zinečnatého..

Důvodem této techniky je smíchání vzorku s roztokem síranu zinečnatého, který má vyšší hustotu než lehčí vajíčka, larvy nebo paraziti..

To umožňuje srážení nejtěžších prvků a lehkých, které se vznášejí a které se objeví v supernatantu po odstředění vzorků..

Materiály

Kontejnery pro odběr vzorků stolice (Zdroj: Bobjgalindo [CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)] prostřednictvím Wikimedia Commons)

- Připravte si roztok síranu zinečnatého o hustotě 1,18 nebo 1,2 g / ml, pokud byl vzorek dříve ošetřen.

- Připravte stojan s dříve označenými zkumavkami.

- Máte odstředivý stroj.

- Mějte po ruce podložní sklíčka a krycí sklíčka mikroskopu. Všechny musí být označeny

- Zajistěte dostupnost řešení Lugol k barvení listů.

- Nechte filtrovat gázu.

- Dejte si nálevky a destilovanou vodu.

- Vyhledejte označené plastové nebo lepenkové nádoby.

- Také aplikátory a sterilní rukojeť o průměru 5 mm.

- Zapalovač pro sterilizaci rukojeti.

Kroky

Makroskopické a mikroskopické vyšetření

U jakéhokoli vyšetření stolice začíná vyšetření takzvaným „makroskopickým vyšetřením“ vzorků..

Je popsána konzistence, barva, přítomnost toho, co se jeví jako krev, přítomnost hlenu a přítomnost dospělých parazitů..

Poté přistoupíme k „mikroskopickému vyšetření“ stolice, záleží to na metodě. Nejjednodušší je metoda přímého nátěru, což je nejjednodušší metoda mikroskopického pozorování parazitů..

Fotografie pozorování střevní parazity Gardia lamblia (Zdroj: Riddlemaster [CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)] prostřednictvím Wikimedia Commons)

Postup zahrnuje umístění malého množství vzorku přímo na sklíčko. Nalijte několik kapek solného roztoku, které by měly mít podobnou velikost jako vzorek. Smíchejte solný roztok se stolicí, dokud nevznikne homogenní směs. Vložte krycí sklíčko a zkontrolujte jej pod mikroskopem.

Originální Faustova technika

Druhý postup se skládá z Faustovy flotační metody, jejíž původní verzi tvoří:

1 - Umístěte asi dva gramy výkalů do vhodné nádoby pro tento účel.

2 - Přidejte 30 ml flotačního roztoku síranu zinečnatého, kterým se vytvoří emulze smícháním roztoku s výkaly.

3 - Přeceďte kovovým sítkem do druhé nádoby a přeneste do zkumavky.

4- Přidejte další flotační roztok, dokud se ve zkumavce nevytvoří meniskus.

5 - Umístěte skleněný krycí sklíčko na meniskus. Nechte odpočívat 10 až 15 minut.

6- Sejměte krycí sklíčko a položte jej na podložní sklíčko, které bude vyšetřeno pod mikroskopem.

Faustova technika odstředěním

Metoda původně nepoužívala centrifugaci, nyní je však zahrnuta, protože se dosáhne lepších výsledků. Tato technika zahrnuje řadu kroků k dosažení správného postupu, jsou následující:

1- Výkaly se promyjí vodou, dobře se promíchají a poté se filtrují s gázou složenou na čtyři. Vzorek se umístí do zkumavky.

2- Odstřeďujte a odstraňte supernatant (vzorky, které jsou uchovávány nad vodou). Kroky 1 a 2 se opakují, dokud není supernatant „čistý“.

3- K síranu zinečnatému se přidá filtrovaný a centrifugovaný vzorek.

4- Dobře se mísí.

5- Znovu centrifugujte po dobu 1 minuty při 2500 otáčkách za minutu (otáčky za minutu).

6- Supernatant se izoluje sterilní smyčkou asi 5 mm; zkumavkami by se nemělo třást.

7- Vzorek získaný ze supernatantu se umístí na podložní sklíčko a kapka Lugolu se může umístit k zabarvení, umístí se krycí sklíčko a pozoruje se pod mikroskopem.

8- Nádoby a zkumavky jsou označeny.

Výhoda

- Prvky použité pro diagnostiku lze pozorovat čisté a bez „detritu“, což usnadňuje pozorování listu a zkracuje dobu použitou pro diagnostiku..

- V supernatantu se izolují larvy, vajíčka a / nebo cysty.

- Je to metoda s velmi nízkými náklady.

- Postup je velmi jednoduchý a snadno implementovatelný.

- Diagnostika je rychlá a přesná.

- Vzhledem k důležitosti a vysokému výskytu parazitóz v chudých zemích jsou tyto levné a snadno použitelné metody ideální pro diagnostiku a sledování těchto patologií..

Nevýhody

Hustota flotačního roztoku vyvolává kontrakci larev, to znamená, že se zmenšují a ve velmi krátké době se mohou deformovat. To nutí zkoušejícího provést diagnózu okamžitě a ošetřené vzorky nelze uchovat pro budoucí vyšetření..

Stejně jako u všech metod mikroskopické identifikace vyžaduje přesné zkušené pracovníky vysoce zkušený vyšetřující personál..

Rychlou deformaci prvků nezbytných pro diagnostiku, i když jsou zjevnou nevýhodou, lze napravit okamžitým mikroskopickým pozorováním.

Reference

  1. Ananias, F. L. (2017). Hodnocení citlivosti Faustovy metody a spontánní sedimentace pro diagnostiku giardiázy. Kubánský žurnál tropické medicíny, 68(dva).
  2. Bartlett, M. S., Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, J. W. (1978). Srovnávací hodnocení modifikované techniky flotace síranem zinečnatým. Časopis klinické mikrobiologie, 7(6), 524-528.
  3. Becker, A. C., Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Citlivost a účinnost vybraných koproskopických metod - sedimentace, kombinovaná sedimentace - flotace síranem zinečnatým a McMasterova metoda. Parazitologický výzkum, 115(7), 2581-2587.
  4. Garcia, L. S., Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, G. P., Pillai, D. R., Procop, G. W.,… & Visvesvara, G. (2018). Laboratorní diagnostika parazitů z gastrointestinálního traktu. Recenze klinické mikrobiologie, 31(1), e00025-17.
  5. Summers, W. A. ​​(1942). Modifikace metody odstředivé flotace síranu zinečnatého pro získání helminthových vajíček ve formalizovaných výkalech. Parazitologický časopis, 28(4), 345-346.

Zatím žádné komentáře